本文標題：" 臨床細菌染色-臨床細菌檢體，都應該先做一片Gram stain"
發布者：yiyi ------ 分類: 技術文章 ------ 人瀏覽過 -----時間：2012-7-4 0:10:21
臨床細菌染色
所有的臨床細菌檢體，都應該先做一片Gram stain，Gram stain技術的好壞，決定G(+)，G(-)非常重要，可由臨近白血球的核顏色推測，正確的染色，細胞核應該是紅紫偏紅色的。
Pus
噬肉菌：Group A Strepto/Staphyl，通常Strepto可以不用做抗菌試驗，但因為cepha、penicillin過敏時，就需要sensitivity test參考，皮膚科感染常見的是Staphylo,一般治療使用prostaphlin(oxacillin).
皮膚下若有空氣，就有膿，染色為G(-)大桿菌，細菌邊不清楚，有時候看到一大團黏液包住細菌一堆，可推測是Klebsiella屬。創傷孤菌Vibrio vulnificans也會引起壞疽，可見于蟹殼穿刺感染，此弧菌可長于B.P不須TCBS就會長，直接鏡檢為G(-)弧型，逗點或直桿菌，有時尾端相接。而出血性水泡G(-),直桿菌，可能Aeromonas。
當檢體Gram染色看到G(+)桿菌時，注意Pus可能來自gangrene氣壞疽，可能是Clostridium，會造成BP雙圈溶血，抗生素使用完全不同。
當病人久臥病床，肺膿瘍的檢體，Gram stain常見多種形狀不同的細菌，有G(-)桿菌，G(+)等，一般檢體內都有厭氧菌。有三個部位來的檢體一定要種厭氧：肺膿瘍，盲腸炎，骨盤腔，檢體特征是Pus有臭味，有時UV燈一照有螢光，G(-)，細長尖尖的為Fusobacterium，多形球桿菌為Bacteroides即可作初步鑑別。
Sputum
痰應該很多WBC，如果取顏色形態不正常之部份染色，每個視野應WBC>25，Epi<10 cell才值得繼續做，Gram stain也是可以提供很多幫助,如Strep penumoncocci是G(+)長端接長端，在BP種久了，會有Ager內凸被菌落消蝕現象。
G(-)cocobacilli 小心 H.influenza，G(-)diplococci可能是(Moraxella)Branhamenlla catarrhalis。而酵母菌則可能來自老人口腔鵝口瘡污染或肺炎的candida。
如果在G(+)桿菌，不是整條藍紫色，有時只是有藍點在菌體上，有時候只看到ghost，就是亮亮的細菌形態，沒染上顏色，就要小心TB存在，再使用acid-fast染色，若有部份耐酸桿菌，可能就有Norcardia存在。AF stain在每HPF有1~9只為(+++)，大于則(++++)，1~9只/10field(++)，1~9只/100field(+)，1~2只/300field(+/-)。
尿液，Urine
尿液應做定量，大于10e5/ml有意義，導尿則大于10e2/ml有意義，尿液中超過2種細菌則通常菌落不多，沒甚么意義。
80~90﹪的報告是Ecoli。Proteus，Kleb，Staphylo，各約2~5﹪直接沈渣染色可作Gram及AF。
Stool
通常Stool一堆細菌較有意義是Salmonella，Shigella，Campylobacter，Clostridim，Serratia,主要取腹瀉之部份，如果看不到WBC，可能是病毒性的，看到單核球增多，可能是S.typhi，PMN上昇則出現Shigella、Campylo等機會較多，腹瀉鏡檢也直接可看出Campylo一部份成海鷗狀，以及Vibrio弧形，逗點，直桿菌。
食物中毒時，有時可見大量的G(+)cocci， S.aureus毒素所致。住院太久的病人，有時可見大量的G(+)Bacilli，可能是 Clostridium difficile，這只細菌很臭。
組織，Tissue
肝膿瘍70﹪是Kleb感染，尤其在DM病人常碰到，G(-)桿菌，特征如前，如果是阿米巴，則檢體呈巧克力色，WBC都看不到，阿米巴躲在肝壁也抽不到，而WBC是被阿米巴吃掉了。
脾臟膿瘍如果有乳酪狀，可能與TB感染有關。
CSF
腦膜炎的特征是頸部僵硬，可見到Strep. pneu，H. influ b，N. men，A,C,B,Y, Kleb，E-coli，Pseudo， Listeria，也會有WBC，若免疫力差的WBC就很少，Gram stain若看到大部份沒染上，少部份邊緣呈色則可能是Crypto，再使用India ink染色，AF stain也需操作。
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